重组腺病毒构建、纯化和滴定等过程非常繁琐和耗时,而我们在这一领域拥有丰富经验,所用腺病毒系统是以人5型E1/E3缺陷型腺病毒DNA为骨架,在克隆、包装、扩增等各部条件做了改进和优化,达到了克隆阳性率更高、质量更可靠、包装稳定、出毒迅速、滴度高等效果。在此基础上,还拓展了更广泛的应用,可以提供各种带报告基因的,带不同标签的腺病毒构建和包装服务。所包装的腺病毒已成功应用于信号转导、基因转位、Co-IP、动物实验和干细胞研究等科研实验。并且可以完成较高难度的克隆构建,包括具有细胞毒性作用基因的腺病毒构建,在短时间内完成从原始质粒到病毒DNA的构建工作。
我们可以在整个腺病毒制备过程中提供服务,其中包括:
*将您的目的基因或shRNA克隆到腺病毒病毒基因组
*生产初始、低滴度的种子病毒
*放大到中到大规模
*病毒纯化(两次氯化铯超速离心)
*滴定(测量病毒滴度(GC))
对于客户所要构建腺病毒的目的基因,客户须提供详细的基因相关信息,包括基因序列,载体序列,载体图谱。
从合同签订之日起,根据不同构建方案、所需载体产量和纯度等,需50到90个工作日完成全部实验。所需费用也各不相同。客户需交纳首期技术服务费(50%服务费),方可进行实验。服务结束时一次结清余款。
客户需提供的信息及材料:
插入目的片段序列信息,原始载体序列信息,载体图谱,酶切分析图等。
鉴定正确的原始质粒,PCR引物及PCR鉴定方法说明(包括PCR体系及PCR条件)(非必需,或需协商),测序引物(非必需,或需协商)。
原始质粒的酶切鉴定报告、测序报告,如果客户确定基因的信息无误,这条非必需。
实验目的、要求,目的基因有无细胞毒性,是否需要构建对照病毒?
实验要求包括:是否自行构建病毒载体?是否要求更换启动子、polyA等基因元件?
实验目的包括:用于细胞实验还是动物实验,需要感染的细胞类型或动物模型类型。